A cultura de tecidos vegetais, também chamada de micropropagação in vitro, se baseia na técnica de propagar plantas a partir de células, tecidos ou órgãos vegetais em tubos de ensaio ou similares de vidro. Esta técnica de propagação tem ganhado lugar de destaque entre as técnicas de biotecnologia relacionadas aos cultivos vegetais por permitir, entre outros, a melhoria na qualidade de mudas ofertadas. Entretanto, um dos maiores problemas relacionados à cultura de tecidos é a existência de diversos fatores, sejam eles bióticos ou abióticos, preponderantes para o sucesso ou o fracasso da técnica em escala comercial. Dentre estes fatores citam-se a origem do explante, a assepsia no processo, o meio nutritivo utilizado, a qualidade da luz fornecida, a temperatura de cultivo, bem como a possibilidade de ocorrência de oxidações fenólicas, vitrificações e contaminações do material. Em função destes aspectos de extrema importância na cultura de tecidos, esta revisão objetivou a investigação destes fatores, bem como dos trabalhos desenvolvidos sobre os mesmos, trazendo resultados e perspectivas para a melhoria do processo produtivo de mudas micropropagadas. Esta investigação demonstrou que apesar de serem cruciais para o sucesso dos cultivos in vitro, estes fatores são passíveis de controle em função de sua adequação de acordo com as espécies trabalhadas, bem como dos métodos empregados no cultivo, o que tem reduzido significativamente as perdas no processo produtivo de mudas, além de potencializar a utilização e expansão desta técnica em escala comercial.