Caracterização da diversidade genética de Escherichia coli isoladas de amostras de água de mananciais que abastecem queijarias representativas da Serra da Canastra - MG

A região da Serra da Canastra é reconhecida por ser um berço de suma importância para a produção do Queijo Minas Artesanal Canastra (QMAC), cuja cadeia produtiva está inteiramente ligada com os recursos naturais locais. O manejo do agroecossistema influencia diretamente a qualidade dos mananciais que suprem as propriedades rurais e as queijarias, considerando que a água é amplamente utilizada nas etapas de higienização dos equipamentos e das instalações que entram em contato com o leite cru. A presença de contaminantes, sobretudo de fonte microbiológica, pode comprometer tanto a qualidade do produto final quanto a saúde dos consumidores. Dentre os agentes bacterianos indicativos de contaminação fecal, a espécie Escherichia coli habita naturalmente no intestino de humanos e outros animais de sangue quente, sobressaindo pela sua relevância epidemiológica e por ser excelente bioindicadora de condições higiênico-sanitárias em água e alimentos, tendo seu isolamento e caracterização molecular como ferramentas essenciais para avaliar a variedade de perfis genéticos no cenário dos agroecossistemas da região. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a diversidade genética de isolados de E. coli oriundos de amostras de água de rios da Serra da Canastra que abastecem propriedades queijeiras representativas desta região. Foram analisadas amostras de água coletadas em 12 rios localizados no entorno do Parque Nacional da Serra da Canastra, durante o período de estação seca de 2022, distribuídas em três campanhas semanais distintas, em pontos próximos às captações utilizadas na produção de Queijo Canastra, com até dez pontos de amostragem por manancial. O isolamento presuntivo de Escherichia coli foi realizado em meio cromogênico específico, seguido de confirmação em Ágar MacConkey. Uma quantidade de 184 isolados com coloração rosa, indicativa de fermentação de lactose, morfologia de bastonetes gram-negativos e crescimento adequado com E. coli foi considerada confirmada e selecionada para a etapa de caracterização molecular. O DNA genômico dos isolados foi extraído por protocolo de precipitação salina e, logo em seguida, quantificado. Os isolados, para cada um dos doze rios, foram submetidos à técnica de fingerprinting molecular rep-PCR (GTG)5, com a finalidade de identificar linhagens clonais. Foram excluídos 64 isolados (34,78%) através da avaliação dos perfis moleculares, considerados clones de outros isolados dentro de um mesmo rio, sendo mantido apenas um representante de cada perfil por manancial para análises posteriores. O Rio 4 apresentou baixa diversidade, com 100% dos isolados pertencentes ao mesmo perfil genético. Por outro lado, o Rio 10 exibiu a maior diversidade clonal, com cada perfil dominante representando apenas 8% dos isolados. Os resultados obtidos nesta pesquisa contribuem para uma melhor compreensão da diversidade de E. coli no ecossistema estudado e para o desenvolvimento posterior de análises do potencial de virulência e resistência desse grupo bacteriano contaminante de água que abastece a linha de produção da mercadoria final, que é o Queijo Canastra.